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Midori Green Advance核酸染料

更新時間:2024-03-14

簡要描述:

MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance是(shi)傳統核酸染(ran)(ran)色劑溴化(hua)乙錠的安全(quan)替(ti)代品。 它是(shi)一種非致癌性和(he)低致突變性染(ran)(ran)料,具(ju)有很高的靈敏度(du),可(ke)用(yong)于(yu)檢測(ce)瓊(qiong)脂糖凝膠中的dsDNA,ssDNA和(he)RNA。 MIDORIGreen Advance可(ke)以與紫外(wai)線或我們創新的藍/綠LED技術結(jie)合使用(yong)。

Catalogue number: MG04(貨(huo)號:MG04)

1 ml MIDORIGreen Advance DNA/RNA stain for in gel or poststaining(1 ml MIDORIGreen Advance DNA / RNA染色(se)劑,用于凝(ning)膠或后染色(se))

Benefits(優點):

  • Perfect in-gel staining of DNA/RNA in agarose gels(瓊脂糖凝膠中DNA / RNA的完美凝膠內染色)
  • No toxicity, non-carcinogenic(無毒,無致癌性)
  • Safe alternative to ethidium bromide(溴化乙錠的安全替代品
  • High fluorescence(高熒光)
  • Optimal for UV-light(優化適合紫外(wai)線(xian))

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下一代凝膠內染色

MIDORIGreen Advance是第二代(dai)非(fei)致(zhi)癌染料(liao)。 經過(guo)紫外(wai)線(xian)或藍/綠(lv)光激(ji)發后,信號更(geng)優(you)化。 它保持(chi)了諸如非(fei)致(zhi)癌性(xing)和優(you)異(yi)的信噪比等優(you)勢。 如圖所示(shi)。 1當使用Blue / Green LED技術時,MIDORIGreen Advance比溴乙錠更(geng)好(hao)。

圖(tu)1:使(shi)用(yong)藍/綠(lv)(lv)LED透射照(zhao)明器比較MIDORIGreen Advance(左(zuo)綠(lv)(lv)色)和(he)溴化(hua)乙錠(ding)(右紅色)的靈敏度。


MIDORIGreen Advance即(ji)使對于(yu)較(jiao)小的(de)(de)DNA片段也顯示出很高的(de)(de)靈敏度(du)。 MIDORIGreen Advance的(de)(de)稀釋倍數(shu)可高達(da)1:25000。 因此(ci),對于(yu)100 ml瓊脂(zhi)糖凝膠染(ran)色(se),4-6μl足夠,導(dao)致(zhi)?17至25升染(ran)色(se)的(de)(de)瓊脂(zhi)糖凝膠。


經驗證的安全性

良好(hao)地(di)替(ti)代(dai)誘變的(de)DNA染色劑溴(xiu)化乙錠(ding)以傳遞強信(xin)號是(shi)*的(de)。 MIDORIGreen Advance發出的(de)信(xin)號強度相當。 但是(shi),不得危及用戶的(de)安(an)全。 因此,使用MIDORIGreen Advance進(jin)行了幾次測試(shi),根據這些測試(shi),MIDORIGreen Advance是(shi)安(an)全的(de)。

 

染色Protocol:

凝膠內染色
準備100毫升的瓊脂糖凝膠溶液(濃度為0.8-3.0%)并加熱,直到溶液*澄清,看不到小的漂浮顆粒。
在凝膠溶液中加入4-6 µl MIDORIGreen Advance DNA Stain,輕輕混合。將凝膠冷卻至50-60ºC,然后將凝膠澆鑄到凝膠托盤中。當凝膠為固體時,加載樣品并進行電泳。
使用UV或(huo)LED照明器(qi)檢(jian)測(ce)波段(duan)。黃色或(huo)綠色的明膠或(huo)玻(bo)璃紙濾鏡應用于攝影。


后染
MIDORIGreen Advance DNA Stain后染液可以使用2-3次。
將要重復使用的染色溶液應優選在黑暗中于室溫下保存。
對于<0.5 cm厚的瓊脂糖凝膠,每100 ml緩沖液應使用10-25 µl的污漬。
合適(shi)的染色時間(5 – 60分鐘)和(he)污(wu)漬的數(shu)量可能取決于凝膠的厚度。


注意(yi):不建議將SDS包含在加載緩(huan)沖液中使用,因(yin)為(wei)由污點和SDS相互作用引起的條帶(dai)外觀(guan)!

 

客戶常見問題解答(FAQ)

問:我可以將Midori Green Advance與(yu)脈(mo)沖場凝膠(jiao)電泳(PFGE)一起使用(yong)(yong)嗎?通常,我使用(yong)(yong)EtBr進(jin)行(xing)后(hou)期處理。

答:您可以(yi)在“Protocol”部分中找到(dao)進(jin)行后染色(se)的方(fang)案。

 

問:您(nin)是否有處(chu)置(zhi)Midori Green Advance的(de)詳細(xi)信(xin)息?我了解該分子對光敏感,我想知道(dao)MGA凝膠在使(shi)用后是否可以(yi)在處(chu)置(zhi)前暴(bao)露于光下?

答:MGA無毒,足以將其作為化學實驗室廢物處理。 MGA的發射率會被光破壞,但這并不意味著化學結構會發生變化。但是沒有必要破壞分子,因為它仍然無害。與溴化乙錠相比,這是*的優勢–無需特殊處理。

 

問:為什么(me)不(bu)能以相同方(fang)式使(shi)用MGA和MGD?

答(da):化學結構*不(bu)同(tong)。我們測(ce)試(shi)(shi)過(guo)將(jiang)MGD用(yong)(yong)作(zuo)MGA,反(fan)之(zhi)(zhi)亦然(ran)。我們不(bu)能同(tong)時推薦(jian)這兩種(zhong)應(ying)用(yong)(yong)。當您嘗(chang)試(shi)(shi)將(jiang)MGD用(yong)(yong)作(zuo)MGA時,您需要(yao)大量MGD和(he)階梯才能獲得可(ke)觀察的(de)波段。通過(guo)這種(zhong)方(fang)式(shi)可(ke)以(yi)檢(jian)測(ce)不(bu)到(dao)(dao)低(di)濃(nong)度(du)的(de)樣品。 MGD設計(ji)用(yong)(yong)于(yu)添(tian)加樣品,并且(qie)(qie)濃(nong)縮程度(du)遠低(di)于(yu)MGA。以(yi)MGA之(zhi)(zhi)類的(de)方(fang)式(shi)使(shi)用(yong)(yong)MGD是(shi)非常不(bu)經濟的(de)–您需要(yao)在凝(ning)膠中添(tian)加10倍以(yi)上(shang)的(de)量才能觀察條帶。當您嘗(chang)試(shi)(shi)將(jiang)MGA用(yong)(yong)作(zuo)MGD時,也會出(chu)現問(wen)題,因(yin)為MGA的(de)濃(nong)度(du)過(guo)高,并且(qie)(qie)運行(xing)方(fang)向(xiang)相(xiang)反(fan)。我試(shi)(shi)圖降低(di)MGA濃(nong)度(du),在這種(zhong)情況下(xia),您會看到(dao)(dao)一(yi)些條帶,但它(ta)們與所使(shi)用(yong)(yong)的(de)稀(xi)釋液無關,非常弱。總結一(yi)下(xia),您可(ke)以(yi)說兩種(zhong)染(ran)料都是(shi)針對不(bu)同(tong)的(de)應(ying)用(yong)(yong)(在凝(ning)膠中和(he)添(tian)加到(dao)(dao)樣品中)設計(ji)的(de)(具有不(bu)同(tong)的(de)結構式(shi))和(he)優(you)化的(de),因(yin)此(ci)不(bu)建議嘗(chang)試(shi)(shi)以(yi)其他方(fang)式(shi)使(shi)用(yong)(yong)它(ta)們。

 

問:MGA和MGD有(you)什(shen)么區別?這些污漬的(de)穩定性如何(he)?

答:主要區(qu)別在(zai)于Midori Green Advance(MGA)用(yong)于凝膠(jiao)(jiao)和后染色(se)(se)(意(yi)味(wei)著它(ta)像溴化乙錠一(yi)樣使(shi)用(yong)),而Midori Green Direct(MGD)直接添加到樣品中(zhong)。根據凝膠(jiao)(jiao)文檔系統(tong)的(de)不同(tong),我們建(jian)議(yi)您使(shi)用(yong)一(yi)種或另一(yi)種,但您可(ke)以在(zai)每種照(zhao)明器(qi)(qi)(UV 302、365 nm,藍色(se)(se)照(zhao)明器(qi)(qi)和藍色(se)(se)/綠色(se)(se)透(tou)射照(zhao)明器(qi)(qi))中(zhong)同(tong)時使(shi)用(yong)這兩種照(zhao)明器(qi)(qi)–只有性能(neng)可(ke)以提高到合適水(shui)平。例如(ru),如(ru)果用(yong)戶使(shi)用(yong)UV透(tou)照(zhao)器(qi)(qi),我們建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)MGA,因(yin)為使(shi)用(yong)該色(se)(se)斑的(de)效果非(fei)常好(hao)。我們的(de)藍/綠色(se)(se)LED儀器(qi)(qi)和MGD可(ke)帶來非(fei)常出色(se)(se)的(de)性能(neng)-*沒有背(bei)景(jing),而且(qie)信(xin)號(hao)強度很(hen)高。兩種污漬在(zai)室溫下均穩定,因(yin)此在(zai)室溫下運輸沒有問題(ti),但我們建(jian)議(yi)將(jiang)污漬保存在(zai)4°C下。

 

問:MGA和MGD是否(fou)可(ke)以與瓊脂糖和丙烯酰(xian)胺凝(ning)膠一(yi)起使用?

答:我(wo)們的客戶給(gei)我(wo)們反饋說MDG和MGA(染色后)可用于丙烯酰胺凝(ning)膠,但主(zhu)要是為(wei)瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠設計的。

 

問:如果我將MGA在(zai)-20°C下(xia)保存6天會怎樣?可以使用嗎?

答:凍結會破壞MGA的功能。您仍然可以(yi)嘗(chang)試,但我們的經驗使冷(leng)凍后的照(zhao)明失效。

 

問:我在瓊脂糖凝膠中(zhong)使用Midori Green Advance,為什(shen)么在凝膠電(dian)泳35分(fen)鐘(zhong)后看不(bu)見小條帶,您有什(shen)么建(jian)議(yi)?

答(da):Midori Green Advance可能(neng)帶有電(dian)荷,并(bing)且(qie)與DNA的方向(xiang)不同(tong),因此(ci)凝(ning)(ning)膠從(cong)底部脫色(se)(se)(se)(se)。要查看小(xiao)樂(le)隊,您(nin)可以將運行時間減少到(dao)25分(fen)鐘。如果您(nin)想讓凝(ning)(ning)膠運行更長的時間,那么您(nin)可以*跡。可以使用(yong)in凝(ning)(ning)膠染色(se)(se)(se)(se),然(ran)后縮短后染色(se)(se)(se)(se)時間,或者只對凝(ning)(ning)膠進(jin)行后染色(se)(se)(se)(se),而(er)無(wu)需先進(jin)行in凝(ning)(ning)膠染色(se)(se)(se)(se)。在這兩種(zhong)情況下,整個凝(ning)(ning)膠都會被(bei)染色(se)(se)(se)(se),并(bing)且(qie)觀察到(dao)非常低的分(fen)子量帶。您(nin)也可以使用(yong)Midori Green Direct代(dai)替(ti)Midori Green Advance。該染料(liao)會添(tian)加到(dao)DNA中,因此(ci)無(wu)論電(dian)泳(yong)多(duo)長時間,每個條帶都會被(bei)染色(se)(se)(se)(se)。另一個優(you)點(dian)是(shi)不存(cun)在背景。特別是(shi)如果您(nin)使用(yong)藍色(se)(se)(se)(se)或藍色(se)(se)(se)(se)/綠色(se)(se)(se)(se)LED燈代(dai)替(ti)紫外線,則會收到(dao)令人驚奇的信號(hao)。

 

問:在Midori Green Advance數(shu)據表上,描述了后期處理多(duo)可以使(shi)用(yong)2-3次。您可以在不損失太多(duo)敏感性(xing)的情況下使(shi)用(yong)發布(bu)后解決方案多(duo)長時間?

答(da):實際上,我們的(de)客戶使(shi)(shi)用(yong)頻率超(chao)過2-3次(ci)。如果染色浴始終變暗,您(nin)可以(yi)在任(ren)何(he)情況(kuang)下使(shi)(shi)用(yong)2-3次(ci)而不(bu)會(hui)降低(di)信號(hao)強度(du)(du)。但也(ye)可以(yi)使(shi)(shi)用(yong)5 – 8次(ci)而不(bu)會(hui)降低(di)信號(hao),具體取決于凝膠的(de)大(da)小和(he)樣品量。如果您(nin)檢測(ce)到強度(du)(du)降低(di),則可以(yi)增加一(yi)點(dian)MGA,從而獲得與以(yi)前相同(tong)的(de)信號(hao)強度(du)(du)。

 

問:到期后可以使用MGA嗎(ma)?

答:是(shi)的,您(nin)可以使用它(ta)。到期日期只是(shi)我們保證的短時間,但通常會(hui)持續更長的時間。

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