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懸浮細胞和貼壁細胞基礎知識介紹

更新時間:2024-03-16   點擊次數:221次

體外培養細胞,根據它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型貼壁型兩大類。

(一)懸浮型細胞

簡(jian)稱懸浮(fu)細(xi)(xi)胞(bao)。在體外培養(yang)時,這些(xie)細(xi)(xi)胞(bao)屬于(yu)非貼壁(bi)依(yi)賴的(de)細(xi)(xi)胞(bao),這些(xie)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)質膜也會與(yu)培養(yang)液底(di)(di)發生黏連(lian)(lian),但最(zui)多不超過5%的(de)表(biao)面(mian)與(yu)培養(yang)液底(di)(di)發生類似(si)于(yu)細(xi)(xi)胞(bao)連(lian)(lian)接樣的(de)黏連(lian)(lian),顯微(wei)視場下細(xi)(xi)胞(bao)往往呈球(qiu)形。

懸浮型細胞主(zhu)要是(shi)來源(yuan)于血液、淋巴組(zu)織的細胞,骨髓瘤(liu)構建的各(ge)種雜交瘤(liu)細胞,某些腫瘤(liu)細胞和轉化細胞。

細(xi)胞呈(cheng)圓形,一般不貼于支持物上,呈(cheng)懸浮生長。這類細(xi)胞容易大量繁殖(zhi)。

體外培養的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)類(lei)型中,少數細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)種(zhong)類(lei)在培養時(shi)不貼附于(yu)支持物上(shang),而(er)以(yi)懸浮狀態生(sheng)長,包括一些取(qu)自血、脾(pi)或骨髓(sui)的原代細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),尤其是血液(ye)白(bai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),以(yi)及一些腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。某些來源于(yu)此類(lei)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株或細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)系也呈(cheng)懸浮狀態生(sheng)長。

細胞(bao)懸浮(fu)生(sheng)(sheng)長(chang)時可以呈單(dan)個(ge)細胞(bao)或細小的(de)細胞(bao)團,胞(bao)體為(wei)圓形。其(qi)優點是(shi)在培養液中(zhong)生(sheng)(sheng)長(chang),生(sheng)(sheng)存空間大,允許長(chang)時間生(sheng)(sheng)長(chang),便于大量繁殖(zhi)。

屬于懸浮型細胞常見的細胞株系有小鼠腹水瘤S180、小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0,人造血系腫瘤細胞U937(見文章結尾圖片)、HL60、K562(見文章結尾圖片)等。技術詳情聯系靶點科技技術支持。

(二)貼壁型細胞

簡稱貼壁(bi)細(xi)(xi)胞。在(zai)體外(wai)培養時,貼壁(bi)型細(xi)(xi)胞就是那些貼壁(bi)依賴的細(xi)(xi)胞,在(zai)匯合(he)成單層生長(chang)以(yi)前,它們(men)的細(xi)(xi)胞質膜超過30%的表面與(yu)(yu)培養液底發生類似與(yu)(yu)細(xi)(xi)胞連(lian)接樣的黏連(lian),顯微視(shi)場下細(xi)(xi)胞一(yi)般(ban)為扁平狀的各(ge)種形(xing)(xing)態。需要注意的是,貼壁(bi)型細(xi)(xi)胞匯合(he)生長(chang)形(xing)(xing)成單層以(yi)后,失去接觸抑制的那些細(xi)(xi)胞株或細(xi)(xi)胞系的細(xi)(xi)胞培養物(wu)中,常常可見或多或少的懸浮樣細(xi)(xi)胞出現。

貼壁型細胞包括大多數哺乳動物的淋巴和血液以外的組織細胞,以及多數腫瘤細胞。需要貼附在帶適量正電荷的固體或半固體表面才能正常生長和分裂。
大(da)多數培養細胞(bao)均為(wei)貼壁型,它們必(bi)須(xu)貼附在支持(chi)(chi)物(wu)表(biao)面(mian)生(sheng)長,這類(lei)細胞(bao)在體(ti)(ti)內(nei)時(shi)各自(zi)具有(you)其特(te)殊的(de)形態,但在體(ti)(ti)外培養時(shi)貼附于支持(chi)(chi)物(wu)后形態上(shang)表(biao)現單一化而失去(qu)體(ti)(ti)內(nei)原(yuan)有(you)的(de)某些特(te)征,多呈上(shang)皮(pi)樣或成纖(xian)維細胞(bao)樣。

正常(chang)貼壁型細胞(bao)具有接(jie)觸抑(yi)(yi)制(zhi)和(he)密度抑(yi)(yi)制(zhi)的(de)雙(shuang)重特性,細胞(bao)相(xiang)互接(jie)觸后(hou)可(ke)抑(yi)(yi)制(zhi)細胞(bao)的(de)運動,因(yin)此細胞(bao)不(bu)會相(xiang)互重疊于(yu)其上面生長(chang)。細胞(bao)生長(chang)、匯(hui)合成片后(hou),雖發生接(jie)觸抑(yi)(yi)制(zhi),但(dan)只要(yao)營(ying)養充分,仍(reng)可(ke)增(zeng)殖分裂,但(dan)當細胞(bao)數量(liang)達到一定密度后(hou),由于(yu)營(ying)養的(de)枯竭(jie)和(he)代謝物(wu)的(de)影響(xiang),細胞(bao)分裂停止,稱為密度抑(yi)(yi)制(zhi)。

腫瘤細(xi)(xi)胞(bao)的接觸(chu)抑(yi)制及密度(du)抑(yi)制往(wang)往(wang)減(jian)弱或(huo)消失,因此細(xi)(xi)胞(bao)可(ke)(ke)向三維空間發展(zhan),導致細(xi)(xi)胞(bao)堆積,并可(ke)(ke)生長至較高的終末(mo)細(xi)(xi)胞(bao)密度(du)。

貼(tie)壁細胞類型(xing)有以下幾(ji)種常見類型(xing)

1.成纖維細胞型

細胞呈(cheng)梭形(xing)、扇(shan)形(xing)、星形(xing)或(huo)(huo)不(bu)規則三角形(xing),中央有卵圓形(xing)核,胞質常向外(wai)伸出3-5個(ge)長短不(bu)一(yi)的突起,生長時呈(cheng)放(fang)射狀(zhuang)。細胞匯合過(guo)程中,細胞的生長呈(cheng)放(fang)射狀(zhuang)、火焰狀(zhuang)或(huo)(huo)漩渦狀(zhuang)。

除了真正的(de)成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外,凡由中胚層(ceng)間(jian)充質起源的(de)組織,如心肌(ji)、平滑肌(ji)、成(cheng)(cheng)骨細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)、血管(guan)內皮等常(chang)呈成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)形態(tai)(tai)。培養(yang)中細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)形態(tai)(tai)與成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)類似(si)時(shi)皆可(ke)稱之為成(cheng)(cheng)纖(xian)(xian)維(wei)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(圖10-2)。

2.上皮型細胞

細(xi)胞(bao)呈扁平不規則多邊形(xing),中央(yang)有圓形(xing)核,細(xi)胞(bao)外觀透明(ming),細(xi)胞(bao)彼此緊密相連成單層生(sheng)(sheng)長(chang)。生(sheng)(sheng)長(chang)時呈膜狀移動(dong),處于(yu)膜邊緣的細(xi)胞(bao)總與膜相連,很少單獨(du)行動(dong)。起源于(yu)內、外胚層的細(xi)胞(bao)如皮(pi)膚表皮(pi)及其衍(yan)生(sheng)(sheng)物、消(xiao)化管上(shang)(shang)皮(pi)、肝胰、肺泡上(shang)(shang)皮(pi)等皆成上(shang)(shang)皮(pi)型(xing)形(xing)態。上(shang)(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)傳代(dai)培養(yang)后形(xing)態特征逐漸趨(qu)于(yu)典型(xing)。

3.游走細胞型

呈(cheng)散在生長(chang),一般不連成片,胞質常(chang)突起,呈(cheng)活(huo)躍(yue)游走或變(bian)形運動,速(su)度快且方向不規則。此(ci)型細(xi)胞不穩定,有時難以和其他細(xi)胞相區別(bie)。起源于(yu)網狀內皮系(xi)統的細(xi)胞屬于(yu)此(ci)類型。

4.多型細胞型

有一些細(xi)胞,如神經(jing)細(xi)胞難(nan)以確定其規律和穩定的形態(tai),統歸于此(ci)類。此(ci)類細(xi)胞在培養(yang)時,其形態(tai)結構容(rong)易受培養(yang)條件(jian)(基質、溫度、pH、營養(yang)、污(wu)染狀況(kuang)和培養(yang)方式等)影響。

如角膜上(shang)(shang)皮細(xi)胞(bao)(bao)在膠原(yuan)基質上(shang)(shang)的形態(tai)與體(ti)內天然形態(tai)相似,但(dan)在塑料基質表(biao)面細(xi)胞(bao)(bao)呈(cheng)單層(ceng)生長,細(xi)胞(bao)(bao)呈(cheng)扁平形。上(shang)(shang)皮型Hela細(xi)胞(bao)(bao)在偏(pian)酸或(huo)偏(pian)堿的培養環境(jing)下會(hui)停(ting)止(zhi)生長,細(xi)胞(bao)(bao)形態(tai)呈(cheng)梭形、不(bu)規則形,及時糾正(zheng)pH后,細(xi)胞(bao)(bao)又(you)恢復原(yuan)來的正(zheng)常(chang)形態(tai)。

盡(jin)管懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)(bao)無須消(xiao)化,但是(shi)(shi)對于(yu)有些實驗,需(xu)要像貼壁細胞(bao)(bao)(bao)一樣固定懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)(bao),困擾了(le)很多(duo)實驗人(ren)員,于(yu)是(shi)(shi)有了(le)細胞(bao)(bao)(bao)掉片(pian)一說。靶(ba)點(dian)科(ke)(ke)技懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)(bao)固定專用(yong)玻片(pian)Shi-Fix,給(gei)這個困擾提供(gong)了(le)解(jie)決方案(an)。無論您(nin)(nin)是(shi)(shi)要固定懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)(bao)做(zuo)免疫熒光,還是(shi)(shi)固定懸(xuan)浮便于(yu)刺激,亦或(huo)固定懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)(bao)用(yong)于(yu)接觸反應。靶(ba)點(dian)科(ke)(ke)技都能給(gei)您(nin)(nin)提供(gong)方案(an),期待(dai)您(nin)(nin)的咨(zi)詢。



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